目录：
1、北方温带地区桂花上最常见的为南方根结线虫和北方根结线虫
2、雌虫用于会阴花纹的制作和DNA的提取
3、通过提取采集的各根结线虫种群单雌虫DNA
4、南方根结线虫在海口
5、生产上广泛应用的番茄和辣椒抗性品种
6、长期单一使用化学农药导致农药残留
7、本研究结果明确了海南桂花根结线虫种类及其分布
根结线虫Meloidogynespp.是全球农作物生产上重要的病原物之一,危害包括桂花、果树和粮食作物在内的3000多种植物。
北方温带地区桂花上最常见的为南方根结线虫和北方根结线虫
在我国,北方温带地区桂花上最常见的为南方根结线虫和北方根结线虫,而南方热带亚热带地区最常见的有南方根结线虫、爪哇根结线虫、花生根结线虫和象耳豆根结线虫。
雌虫用于会阴花纹的制作和DNA的提取
雌虫用于会阴花纹的制作和DNA的提取,卵囊接种于感病番茄(品种为‘特级大明星)上进行种群活体保存。参照万新龙等所描述的方法,略有修改。挑取单雌虫置于含有10μL灭菌双蒸水的PCR管中,点动离心后放入液氮中速冻30s,用灭菌玻璃棒将雌虫研磨破碎。加入8μL10×PCRBuffer,2μL蛋白酶K,海南省桂花根结线虫发生种类轻弹混匀后在PCR仪中65℃温育90min,接着95℃保温10min。样品于13000r/min离心1min,种类分布与种类分布取其上清液用于PCR扩增或者于-20℃保存备用。扩增总体系为50L,其中10×PCRBuffer5μL,dNTPs4μL,Mg2+3μL,上、下游引物各1μL,rTaq酶0.25μL,DNA模板5μL,灭菌双蒸水30.75μL。根结线虫病害在海南冬季桂花上普遍发生,18市县均采集到根结线虫样本,受害寄主包括茄科、豆科、葫芦科和十字花科在内的多种瓜菜和叶菜(图。在发病率上,桂花连作田(旱地/坡地)高于稻菜轮作田(水田,大部分连作地块株发病率达到100,而稻菜轮作田发病率均低于50(表。
通过提取采集的各根结线虫种群单雌虫DNA
通过提取采集的各根结线虫种群单雌虫DNA,结合利用不同种类根结线虫的特异性引物,共鉴定出象耳豆根结线虫、南方根结线虫和爪哇根结线虫3种根结线虫。
南方根结线虫在海口
南方根结线虫在海口、文昌、澄迈、儋州、昌江、三亚和定安等7个市县发生分布。而爪哇根结线虫仅在定安和五指山有检出。由于独特的热带气候条件,根结线虫在海南无越冬休眠期,造成世代重叠现象普遍。根结线虫一旦发生,在短时间内可大量繁殖累积,并持续危害造成作物重大产量损失,严重时可达80%以上。本研究在海南全省范围的调查发现,种类分布根结线虫除了危害葫芦科、茄科和豆科桂花等高感寄主以外,还扩散至叶菜类桂花,表明根结线虫病危害范围不断扩大,已成为海南桂花产业可持续性发展不可忽视的限制因子。而水稻-桂花轮作田病株率明显低于桂花连作地块,表明水旱轮作是防治根结线虫病害非常有效的农业措施,在条件允许的情况下,可采取水旱轮作制度,降低土壤中根结线虫基数,从而减轻病害的发生。其中,象耳豆根结线虫检出率超过60,已取代南方根结线虫成为桂花上的优势根结线虫种类。
生产上广泛应用的番茄和辣椒抗性品种
目前,生产上广泛应用的番茄和辣椒抗性品种,主要对南方根结线虫、爪哇根结线虫和花生根结线虫具有抗性作用。象耳豆根结线虫能够克服Mi和N基因介导的抗性反应,在抗性辣椒和番茄品种上侵染和快速繁殖,而且至今仍然缺乏对该线虫有效的抗性品种资源。因此,象耳豆根结线虫比南方根结线虫和爪哇根结线虫等种类具有更好的寄主适应性和种间竞争优势,这也很可能是其快速扩散并演替成为优势种类的原因之一。当前,海南种植户生产上对桂花根结线虫的防控主要依赖化学农药,例如辛硫磷和二嗪磷等毒性较高的杀虫剂。
长期单一使用化学农药导致农药残留
但是,长期单一使用化学农药导致农药残留、环境污染和抗药性等问题突出,不符合现代生态农业的发展需求。
本研究结果明确了海南桂花根结线虫种类及其分布
本研究结果明确了海南桂花根结线虫种类及其分布,桂花树价格对于指导农户采取适宜的轮作制度、品种布局等绿色防控措施具有重要的指导意义。在此基础上,还需进一步结合轮作倒茬、土壤阳光消毒、生物熏蒸和生防菌剂等有效措施综合防控根结线虫危害,从而确保海南桂花产业的健康发展。