桂花树价格[侵染甜椒的桂花褪绿病毒的分子鉴定]

2022-07-08 00:30:02

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目录：
1、甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒的将具有典型症状的叶片在液氮中研磨
2、侵染鉴定目前
3、甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒其防治策略和方法可参考许多文献中介绍的桂花黄化曲叶病毒综合防治方法
4、桂花树价格利用逆转录获得的cDNA
　　

甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒的将具有典型症状的叶片在液氮中研磨

　　将有典型症状的叶片在液氮中研磨,0.1g粉末转移到1.5ml离心管中。快速加入1mLTRIzol试剂,分子鉴定桂花树价格摇匀,室温离心5min。将上清转移至1.5ml离心管中,加入0.2ml氯仿混合,甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒室温放置5min。

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侵染鉴定目前

　　目前国内外还没有抗ToCV的品种,应采取综合措施控制烟粉虱和病毒的发生和传播。

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25μLPCR反应体系为:cDNA2μL,桂花树价格dNTPs0.65μL,上游引物ToC5,侵染鉴定桂花褪绿病毒的侵染鉴定桂花褪绿病毒下游引物ToC60.5μL,甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒的10×反应缓冲液2.5μL,TaqDNAPolymerase0.25μL,ddh2o18.6μL。所有PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离,切下500bp的目的带,侵染鉴定桂花褪绿病毒的用凝胶回收试剂盒纯化,克隆至pMD18T载体。将PCR扩增得到的450bp片段纯化,克隆至pMD18T载体并测序。利用NCBI序列比对工具核母粒(Nucleotideblast)对克隆序列进行分析,甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒的根据相似性判断病毒种。大肠杆菌DH5α的转化。由白蛉传播的病毒病已经给桂花茄科作物生产等造成了严重的损失,分子鉴定是桂花黄叶病毒引起的最典型的病害之一,一些双生病毒如片桂花黄叶病毒病,但TYLCV感染辣椒一般不会引起明显症状,侵染鉴定桂花褪绿病毒的对甜椒生产的影响也不明显[11,侵染鉴定桂花褪绿病毒所以目前在甜椒生产中普遍不重视烟粉虱的防治。再次离心后,甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒的将上清液转移至1.5mL离心管中,加入等量异丙醇混合均匀。
　　

甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒其防治策略和方法可参考许多文献中介绍的桂花黄化曲叶病毒综合防治方法

　　其防治策略和方法可参考许多文献中介绍的桂花黄叶曲病毒综合防治方法,侵染鉴定桂花褪绿病毒的主要措施为培养无毒苗、防治烟粉虱和清除其他寄主。2004年10月在北京市大兴区甜椒大棚内采集到具有典型间叶性黄化症状和黄褐色斑点的甜椒叶片。

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处理后部分直接提取总RNA,其余放入-20℃冰箱保存备用。由于烟草粉虱是ToCV的传播媒介,在许多作物和杂草[10]中非常常见,而且每年都会发生,特别是在设施栽培条件下,甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒的这类褪绿病毒病大规模发生和传播的可能性非常大。最后,将其溶解在不含核糖酶的去离子水中。结果表明,采集到的甜椒样品可能受到ToCV的危害。
　　

桂花树价格利用逆转录获得的cDNA

　　利用反转录获得的cDNA,用Dovas等人[8]报道的ToC5和ToC6引物检测ToCV,侵染鉴定PCR扩增出编码ToCV的HSP70h基因的部分序列。ToCV引起的褪绿性褪绿症的症状与植物营养缺乏的症状相似,侵染鉴定桂花褪绿病毒在病害调查中难以正确判断其发生。在室温下放置30分钟。ToCV引起的黄萎病虽然不会导致作物歉收,但其造成的损失多为30~40,产量下降明显。将5μL5×firststrandbuffer、0.5μLRNAaseInhibitor和1μLMMLV逆转录酶充分混合,37℃反应60min。将总RNA分别加入无籽酶离心管中,0.5muL10mumol/loligo,分子鉴定桂花树价格0.5muL10mumuLdNTPMixmol/lrandomhexamersprion和1个非核酶超纯水补充体积至185muL;65℃反应5min,侵染鉴定立即冰浴2min。离心后,沉淀用75%乙醇洗涤。以反转录获得的cDNA为模板,甜椒侵染鉴定桂花褪绿病毒利用ToC5和ToC6引物进行PCR检测,在典型症状甜椒样本中扩增出450bp条带,与感染ToCV[7]的桂花阳性对照样本扩增结果一致(图2。虽然国外[16]已有很多研究和报道,侵染鉴定但ToCV是近年来在国内发现的新病毒,侵染鉴定桂花褪绿病毒桂花树价格其在国内的发生和危害还需要详细调查研究。核母细胞序列相似性检索和分析结果显示,北京郊区辣椒阳性样本cDNA扩增得到的候选病毒基因组部分序列与ToCV序列相似性最高(99,表明北京郊区采集的辣椒样本准确感染了ToCV。阳性克隆确认后,用华大基因对序列进行测序。

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